敲降miR-454-3p上调细胞周期蛋白G2增强乳腺癌多柔比星耐药细胞的敏感性研究

作者：魏秀丽^*; 龙波; 黄恺; 吕薇; 郝钊

来源：中国临床药理学杂志, 2022, 38(24): 2984-2988.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.24.012

• 多柔比星
• 乳腺癌
• miR-454-3p
• 细胞周期蛋白G2

目的 探讨miR-454-3p通过细胞周期蛋白G2(CCNG2)对乳腺癌MCF-7/多柔比星(ADR)细胞ADR耐药性的调控机制。方法 MCF-7细胞用不同浓度的ADR间歇诱导构建MCF-7/ADR耐药细胞模型，当浓度为6.0μmol·L-1时，细胞稳定增殖，获得MCF-7/ADR耐药细胞。将MCF-7/ADR细胞分为NC组(MCF-7/ADR细胞)、转染1组(MCF-7/ADR细胞中转染miR-454-3p inhibitor)、转染2组(MCF-7/ADR细胞中转染pcDNA-CCNG2)、转染3组(MCF-7/ADR细胞中转染pcDNA-CCNG2+miR-454-3p mimic)、NC mimics组(MCF-7/ADR细胞中转染miR-454-3p mimic阴性对照)、miR-454-3p mimcs组(MCF-7/ADR细胞中转染miR-454-3p mimic)。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测miR-454-3p的表达水平；用蛋白质印迹法检测CCNG2的表达水平；用噻唑蓝法检测细胞的增殖活力。结果 MCF-10A、MCF-7和MCF-7/ADR细胞中miR-454-3p相对表达水平分别为2.14±0.11,4.67±0.21和8.85±0.24,两两比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。NC mimic组、miR-454-3p mimic组、NC组和转染2～3组的CCNG2蛋白相对表达水平分别为0.97±0.08,0.47±0.09,1.09±0.11,1.52±0.09和1.07±0.10,NC mimic组与miR-454-3p mimic组相比，差异有统计学意义(P<0.05)。NC组和转染1～3组的48 h细胞增殖活力分别为0.71±0.11,0.52±0.11,0.61±0.11和0.70±0.10,NC组与转染1～2组相比，转染2组与转染3组相比，差异均有统计学意义(均P<0.05)。StarBase网站预测显示，miR-454-3p与CCNG2具有结合位点。结论 敲降miR-454-3p通过上调CCNG2增强MCF-7/ADR细胞对ADR的敏感性。