摘要
目的 探讨影响斑马鱼幼鱼心脏发育和运动行为的二甲亚砜(DMSO)浓度。方法 受精后4 h斑马鱼囊胚暴露含终浓度(V/V)为0.15%,0.30%,0.45%和0.60%DMSO的E3孵化液中,持续6 d。用Noldus斑马鱼幼鱼行为学分析系统,于暴露2,3和4 d,记录胚胎和幼鱼心率;暴露6 d进行行为学实验,检测幼鱼游动时间、游动速度、游动距离和游动频次;暴露2,4和6 d,RT-PCR检测心脏发育相关基因心房特异性肌球蛋白重链(amhc)和心室特异性肌球蛋白重链(vmhc)基因及运动相关基因谷氨酸脱羧酶1b(gad1b),γ氨基丁酸A型受体亚基α1(gabra1)和γ氨基丁酸转氨酶(abat)mRNA表达水平。结果 与正常对照组相比,0.3%~0.60%DMSO对胚胎(暴露2 d)心率无影响;幼鱼(暴露4 d)心率显著降低(P<0.05,P<0.01)。行为学实验结果显示,与正常对照组相比,暴露6 d,0.3%~0.60%DMSO组幼鱼游动时间、游动速度、游动距离和游动频次显著下降(P<0.05)。RT-PCR结果显示,与正常对照组相比,暴露2 d,仅0.60%DMSO组胚胎vmhc mRNA表达水平显著降低(P<0.05),DMSO 0.15%~0.60%组gad1b mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),仅0.45%DMSO组gabra1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),0.15%DMSO组abat mRNA表达水平显著上调(P<0.01),而DMSO 0.45%和0.60%组显著下调(P<0.01);暴露4 d,0.15%~0.60%DMSO组gad1b,gabra1和abat mRNA表达水平均显著下降(P<0.01);暴露6 d,0.15%~0.60%DMSO组gad1b mRNA表达水平均显著下降(P<0.01),abat mRNA表达水平显著上调(P<0.01),0.60%DMSO组gabra1 mRNA表达水平显著上调(P<0.01)。结论 DMSO浓度≥0.3%,持续暴露6 d,对斑马鱼心率、运动行为、心脏发育相关基因和运动相关基因表达有影响。
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单位内蒙古民族大学; 药物研究所