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摘要
乙烯作为重要的植物激素之一，在植物逆境胁迫应答中发挥重要作用。ACS基因是乙烯合成过程中的关键限速酶（ACC合成酶）基因，本研究通过探究紫花苜蓿MsWRKY33转录因子对ACS基因的调控关系，为MsWRKY33参与紫花苜蓿耐盐胁迫响应的具体调控机制奠定理论基础。利用同源克隆、载体构建、酵母单杂交、酵母双杂交、qRT-PCR等技术，验证MsWRKY33对AtACS2和MsACS2的转录调控，并对盐胁迫下转基因株系中MsACS2表达模式进行分析。结果显示：MsWRKY33转录因子可以与W-box元件特异性结合，且对AtACS2和MsACS2具有转录调控作用；MsWRKY33转基因株系中MsWRKY33基因的表达量显著高于对照，转基因株系中MsACS2的表达是在MsWRKY33基因大量表达后呈上升趋势，进一步说明紫花苜蓿MsACS2基因的表达可能受MsWRKY33转录因子的正向调控。研究结果表明紫花苜蓿受到盐胁迫时可诱导MsWRKY33的表达，MsWRKY33转录因子通过正向调控MsACS2表达，可能影响乙烯合成，从而影响紫花苜蓿的盐胁迫响应。
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