miR-320a调控水通道蛋白4对阿尔茨海默病细胞模型的影响

作者：李俐娟; 邵卫; 周冰凌; 邱昕; 吴潇; 梅俊华; 罗利俊^*

来源：中华物理医学与康复杂志, 2021, 43(11).

• 阿尔茨海默病
• miR-320a
• β淀粉样蛋白
• 水通道蛋白4

目的探讨miR-320a调控水通道蛋白4(AQP4)对阿尔茨海默病细胞模型的影响。方法采用神经生长因子(NGF)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)为神经元细胞, 观察PC12组和神经元细胞组的细胞形态。采用β淀粉样蛋白(Aβ)处理诱导的神经元细胞, 构建AD细胞模型。根据处理因素的不同将培养细胞分为对照组(不做特殊处理)、miR-320a模拟剂组(加入miR-320a模拟剂50 nmol/L)、miR-320a抑制剂组(加入miR-320a抑制剂50 nmol/L)、Aβ处理组(加入Aβ)、Aβ+miR-320a模拟剂组(加入Aβ+miR-320a模拟剂50 nmol/L)和Aβ+miR-320a抑制剂组(加入Aβ+miR-320a抑制剂50 nmol/L)。采用CCK8法检测细胞活力。利用RT-PCR检测目标基因AQP4、miR-320a、Bax、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA的相对表达。采用免疫印迹法检测目标基因AQP4、Bax、Bcl-2蛋白的相对表达。结果 PC12经NGF诱导后, 与PC12组比较, 神经元细胞组泛素羧基末端水解酶-L1(Uch-L1)基因表达明显下调, 神经丝蛋白(NFP)、微管结合蛋白2(MAP2)、AQP4基因表达明显上调, MAP2和AQP4蛋白相对表达明显增高。造模后, 与对照组比较, Aβ处理组神经元细胞凋亡增加, 细胞活力明显减低, miR-320a、AQP4、Bcl-2的mRNA及AQP4、Bcl-2蛋白表达明显减少, Bax的mRNA及蛋白表达明显增加。与Aβ处理组比较, Aβ+miR-320a模拟剂组, 细胞活力明显增加, miR-320a、AQP4、Bcl-2的mRNA及AQP4、Bcl-2蛋白表达明显增加、Bax的mRNA及蛋白表达明显降低。与Aβ+miR-320a模拟剂组比较, Aβ+miR-320a抑制剂组细胞活力明显降低, miR-320a、AQP4、Bcl-2的mRNA及AQP4、Bcl-2蛋白表达明显降低, Bax的mRNA及蛋白表达明显升高。结论 miR-320a可以上调AD细胞模型中AQP4的表达, 减少细胞凋亡, 增加细胞存活率。

• 单位
  武汉市第一医院; 神经内科