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摘要
目的评价异丙酚对小鼠神经干细胞增殖的影响及转录因子特异性蛋白1(Sp1)-表皮生长因子受体(EGFR)-蛋白激酶B(Akt)信号通路在其中的作用。方法分离和培养C57BL/6小鼠原代神经干细胞, 稳定传代后使用免疫荧光染色鉴定。取第3～6代神经干细胞, 采用随机数字表法分为3组(n=21):生理盐水对照组(C组)、异丙酚组(P组)和异丙酚+Sp1抑制剂光神霉素组(PP组)。P组加入终浓度10 μmol/L异丙酚, PP组加入终浓度10 μmol/L异丙酚、终浓度100 nmol/L光神霉素, C组加入等容量生理盐水, 孵育6 h后更换培养基, 继续培养。于药物处理结束后24、36、48、60和72 h时使用细胞计数法观察神经干细胞增殖情况;于药物处理结束后6 h时, 采用实时荧光定量PCR法检测Sp1 mRNA和EGFR mRNA的表达, 采用Western blot法检测EGFR、Sp1和磷酸化Akt(p-Akt)的表达。结果与C组比较, P组药物处理结束后48、60和72 h时神经干细胞计数增多, EGFR及其mRNA、Sp1及其mRNA和p-Akt表达上调(P<0.05或0.01), PP组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。与P组比较, PP组药物处理结束后48和60 h时神经干细胞计数减少, EGFR及其mRNA、p-Akt表达下调(P<0.05或0.01)。结论异丙酚可促进小鼠神经干细胞增殖, 机制可能与激活Sp1-EGFR-Akt信号通路有关。
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