三种补肾方含药血清对衰老骨髓间充质干细胞中COLⅠ和ALP的影响

作者：黄勇; 董克芳^*; 王凡; 杨强健

来源：湖南中医药大学学报, 2022, 42(07): 1082-1086.

• 健骨二仙丸
• 金匮肾气丸
• 六味地黄丸
• 衰老骨髓间充质干细胞
• 成骨分化
• Ⅰ型胶原蛋白
• 碱性磷酸酶

目的 研究健骨二仙丸、金匮肾气丸和六味地黄丸含药血清对衰老骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）成骨分化过程中Ⅰ型胶原蛋白（collagen typeⅠ, COLⅠ）和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）表达的影响，探讨3种补肾方治疗骨质疏松症的机制。方法 将40只SD大鼠分为健骨二仙丸组、金匮肾气丸组、六味地黄丸组、空白对照组，每组10只。分别灌胃75.9 g/kg健骨二仙丸、89.1 g/kg金匮肾气丸、85.8 g/kg六味地黄丸和等体积生理盐水，每天定时灌胃2次，连续7 d，制备含药血清。用H2O2将P3代BMSCs处理成衰老细胞，采用β-半乳糖苷酶染色进行观察。衰老BMSCs分为6组：模型组、诱导组、健骨二仙丸含药血清组、金匮肾气丸含药血清组、六味地黄丸含药血清组、空白血清组，于诱导第4、8、12、16天采用Real-time PCR法和Western blot法检测COLⅠmRNA及蛋白表达水平，并在第4、8天时收集细胞上清液检测ALP活性。结果 衰老BMSCs被β-半乳糖苷酶染色成深蓝色，而正常细胞颜色无明显改变。在第4、8、12、16天，与模型组比较，诱导组、空白血清组COLⅠ表达水平均升高（P<0.05）；与诱导组、空白血清组比较，健骨二仙丸含药血清组、金匮肾气丸含药血清组COLⅠ表达水平均升高（P<0.05）。在第4、12天，与诱导组相比较，六味地黄丸含药血清组COLⅠ表达水平升高（P<0.05）。在第4、8天，与模型组比较，诱导组、空白血清组ALP活性表达均明显升高（P<0.05）。与诱导组、空白血清组比较，健骨二仙丸含药血清组、金匮肾气丸含药血清组、六味地黄丸含药血清组ALP活性表达明显升高（P<0.05）。结论 健骨二仙丸、金匮肾气丸和六味地黄丸均能增加衰老BMSCs成骨分化过程中COLⅠ的表达和ALP活性。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第二附属医院