利用双向启动子型RNA干涉载体构建随机RNA干涉文库的初步研究

李婧; 付汉江; 朱捷; 邢瑞云; 凌世淦; 孙志贤; 郑晓飞

摘要

目的:利用双向启动子型RNA干涉载体pRHU构建随机RNA干涉文库。方法:分别构建基于pRHU载体的绿色荧光蛋白EGFP和p53的干涉质粒,验证双向启动子型RNA干涉载体的可用性。设计合成满足pRHU载体特点的干涉文库随机模板,经PCR扩增克隆入pRHU载体,转化感受态细胞获取随机干涉文库。随机挑选20个菌落测序,评价随机文库质量。结果:双向启动子型RNA干涉载体pRHU能在哺乳动物细胞中对外源基因EGFP和内源基因p53进行有效的干涉,表明该载体是一个有效的干涉载体,可以用于构建随机RNA干涉文库。本研究采用的构建策略可在较短时间内,用50μg pRHU载体获得4×106个克隆。随机挑选20...

单位
军事医学科学院基础医学研究所; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所

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更新时间：2018-12-12 11:46

利用双向启动子型RNA干涉载体构建随机RNA干涉文库的初步研究

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