重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP的构建与鉴定

作者：赵红; 王苏平; 张拥波; 王得新

来源：实用医学杂志, 2012, (04): 526-529.

• 脑血管障碍
• 腺病毒载体
• Olig1
• 基因重组 Cerebrovascular disorders
• Adenovirus vector
• Olig1
• Gene cloning

目的:转录因子Olig1调控了少突胶质前体细胞的分化和成熟,并参与了脱髓鞘损伤后的修复,是治疗脱髓鞘疾病的候选基因,在缺血性脑血管病的治疗中具有极大的应用价值。本实验旨在构建携带Olig1基因的重组腺病毒载体。方法:pDC315-Olig1为模板,聚合酶链反应扩增酶切Olig1片段,连接到带有eGFP标记基因的载体质粒pDC315-eGFP上,构建穿梭质粒pDC315-Olig1-eGFP,经PCR,酶切及测序鉴定后,利用AdMax包装系统,通过脂质体2000的介导与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组后产生复制缺陷型重组腺病毒载体Ad5-Olig1-eGFP...

• 单位
  大连市中心医院; 首都医科大学附属北京友谊医院