c-Casitas B谱系淋巴瘤原癌基因蛋白参与高糖抑制内皮细胞成管

作者：谌程程; 李余杰; 黄宇婧; 陈爱军^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(06): 1082-1084.

• 高糖
• 人脐静脉内皮细胞
• 血管生成

目的探索高糖培养下内皮细胞c-Casitas B谱系淋巴瘤原癌基因蛋白(c-Cbl)表达与活性变化对其成管的影响。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别以5.5 mmol/L正常浓度葡萄糖(NG)、15.2 mmol/L中等浓度葡萄糖(MG)和25.0 mmol/L高浓度葡萄糖(HG)的培养基处理24 h, 采用锁核酸修饰的反义寡核苷酸间隔物(LNA Gapmers)下调c-Cbl表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测c-Cbl表达及磷酸化水平。侵袭小室(Transwell)、细胞计数试剂盒(CCK-8)试验检测细胞迁移、增殖能力, 成管实验判断细胞的成管能力, 并通过t检验评估两组间差异。结果 HG组细胞c-Cbl在Y731位点的相对磷酸化水高于NG组(3.27±0.18比1.00±0.19, t=15.140, P<0.01), HG组细胞迁移数低于NG组[(38.33±6.51)个比(180.67±16.17)个, t=-14.147, P<0.01], HG组CCK-8吸光度值低于NG组(0.45±0.05比1.25±0.05, t=-19.596, P<0.01), HG组细胞成管水平低于NG组[相对总长度(0.42±0.08)比(1.00±0.11);相对结节数(0.36±0.07)比(1.00±0.07);相对网眼结构(0.32±0.08)比(1.00±0.10);t=-7.119、-10.870、-9.114, P<0.01]。另外, 高糖下调c-Cbl(HG+c-Cbl KD)组CCK-8吸光度值高于高糖对照(HG+NC)组(0.81±0.06比0.46±0.06, t=6.906, P<0.01)、其迁移细胞数也高于HG+NC组[(85.00±9.00)个比(43.67±9.30)个, t=5.534, P<0.01], 并且HG+c-Cbl KD组细胞的成管能力高于HG+NC组[相对总长度(0.72±0.05)比(0.42±0.10);相对结节数(0.64±0.08)比(0.33±0.12);相对网眼结构(0.62±0.08)比(0.34±0.08);t=4.874、3.734、4.266, P<0.05]。结论高糖培养下c-Cbl磷酸化激活可抑制血管内皮细胞成管能力。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 中国人民解放军陆军军医大学; 新桥医院