绵羊瘤胃上皮细胞的体外分离培养、冻存及复苏方法

作者：金鑫; 张曼; 王云鹤; 魏方; 温婧怡; 杨银凤

来源：中国农业大学学报, 2019, (05): 57-66.

• 绵羊
• 瘤胃上皮细胞
• 原代培养
• 传代培养
• 冻存
• 复苏 sheep
• rumen epithelial cells
• primary culture
• subculture
• cryopreservation
• resuscitation

本研究旨在建立绵羊瘤胃上皮细胞(Ovine rumen epithelial cells,ORECs)的分离培养、冻存和复苏方法,为反刍动物瘤胃功能的研究和相关瘤胃疾病的发病机制研究提供功能性的细胞模型。以绵羊瘤胃为研究对象,采用胰蛋白酶连续消化法对瘤胃组织进行不同时间(40、30、20、10、10、8和5 min)的消化,并对每次消化后的瘤胃组织和消化液分别进行H.E染色分析和显微镜观察,以确定细胞开始收集及终止消化的时间,最后将收集的瘤胃上皮细胞进行原代培养。在传代培养时,运用差时消化法和差速贴壁法对ORECs进行纯化,并从细胞形态学、细胞生长曲线、角蛋白18(CK-18)免疫荧光染色和上...

• 单位
  内蒙古农业大学; 农业部