HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母的研究

作者：周小玲; 李子龙; 孙平楠

来源：现代生物医学进展, 2009, (18): 3427-3428+3609.

• 乙肝病毒前S1蛋白
• 高效转化
• 毕赤氏酵母 HBV PreS1
• Efficient transformation
• Pichia Pastoris

目的:实现HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母。方法:分别将乙肝病毒前S1蛋白和绿色荧光蛋白克隆到表达载体pPIC9K,获得重组质粒pPIC9K-EGFP-preS1,SacI位点酶切线性化,采用醋酸锂(LiAc)和二硫苏糖醇(DDT)对巴斯德毕赤氏酵母Pichia Pastoris GS115预处理,在电压1.5kv、电容25F条件下进行电击转化。电击后立即迅速稀释在冰预冷的1M的山梨醇中,混匀后取100l的菌液均匀涂布YNBG平板,利用HIS4标记筛选转化子。结果:发现改进后的转化方法pPIC9K-EGFP-preS1的转化率提高到164×104个转化子/1μgpPI...

• 单位
  中国科学院; 汕头大学