人支气管上皮细胞地塞米松耐药与MUC1表达的关系

作者：韩丽丽; 李明娴; 尹凤先; 丁艳艳

来源：山东医药, 2020, 60(34): 57-60.

• 慢性阻塞性肺疾病
• 人支气管上皮细胞
• 地塞米松
• 耐药
• 黏蛋白1

目的探讨人支气管上皮细胞地塞米松耐药与黏蛋白1(MUC1)表达的关系。方法制备香烟烟雾提取物(CSE),体外培养人正常支气管上皮细胞NHBE(以下称NHBE细胞),分别给予终浓度为0、1%、2.5%、5%、10%CSE干预,采用MTT法检测细胞存活率,采用ELISA法检测培养上清液炎症因子IL-8、粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。选择引起NHBE细胞炎症因子IL-8、GM-CSF分泌增加的CSE最小浓度进行后续实验。取NHBE细胞,予终浓度为1×10-8mol/L的地塞米松干预1个月,收集细胞,设为耐药细胞组,加入适量CSE溶液和地塞米松,使CSE终浓度达到上述筛选的最小浓度、地塞米松终浓度达到1×10-8mol/L;另取NHBE细胞,随机分为非耐药细胞1组和非耐药细胞2组,非耐药细胞1组加入适量CSE溶液,使CSE终浓度达到上述筛选的最小浓度;非耐药细胞2组加入适量地塞米松,使地塞米松终浓度达到1×10-8mol/L。各组干预48 h,采用ELISA法检测培养上清液炎症因子IL-8、GM-CSF,采用RT-qPCR法检测MUC1 mRNA相对表达量。结果随着CSE浓度升高,NHBE细胞存活率逐渐降低,呈剂量依赖性(F=8.520,P <0.01)。5%、10%CSE干预后NHBE细胞存活率明显低于0、1%、2.5%CSE干预后,并且10%CSE干预后NHBE细胞存活率低于5%CSE干预后(P均<0.05)。而0、1%、2.5%CSE干预后NHBE细胞存活率两两比较差异均无统计学意义(P均> 0.05)。与0、1%、2.5%CSE比较,5%、10%CSE均能使NHBE细胞炎症因子IL-8、GM-CSF分泌明显升高(P均<0.05)。引起炎症因子IL-8、GM-CSF水平增加的CSE最小浓度为5%,故选择5%CSE进行后续实验。耐药细胞组炎症因子IL-8、GM-CSF水平明显高于非耐药细胞2组(P均<0.05),而与非耐药细胞2组比较差异均无统计学意义(P均> 0.05)。耐药细胞组MUC1 mRNA相对表达量均低于非耐药细胞1组和非耐药细胞2组(P均<0.01),而非耐药细胞1组与非耐药细胞2组MUC1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0.05)。结论人支气管上皮细胞地塞米松耐药可能与MUC1表达降低有关。

• 单位
  首都医科大学; 吉林大学第一医院