青枯菌Ⅲ型分泌系统HrcN原核表达与亚细胞定位

作者：周大祥; 杨俊年; 龙泉洲; 殷幼平; 熊书^*

来源：西北农业学报, 2022, 31(09): 1228-1234.

• 青枯菌
• T3SS
• HrcN
• 原核表达
• 亚细胞定位

为探究青枯菌Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system, T3SS)HrcN在致病过程中的功能，分别克隆青枯菌CBM613菌株的hrcN基因并连接至pET30a和pRI-eGFP载体，转化寄主细胞，开展原核表达及亚细胞定位研究。结果显示，HrcN蛋白是T3SS的结构组分之一，具有ATP酶活性，可在胞内水解ATP酶为效应蛋白的分泌过程提供能量。蛋白亚细胞定位预测表明，青枯菌HrcN蛋白定位于细胞内膜和细胞质，激光共聚焦定位结果显示，HrcN蛋白部分在叶绿体表达，部分在细胞内膜和细胞质表达，与蛋白亚细胞定位预测结果基本一致。据此推测HrcN是一种定位于细胞内膜上的外周蛋白，该结论为后续研究青枯菌T3SS的功能及其致病机制奠定基础。

• 单位
  生命科学学院; 重庆三峡学院; 重庆三峡医药高等专科学校; 重庆大学