基于重叠延伸PCR法的定点突变技术

作者：戴灿; 苗聪秀; 卢光琇

来源：现代生物医学进展, 2010, 10(03): 411-412.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2010.03.004

• 重叠延伸PCR
• 定点突变 Overlap extension PCR
• Site-directed mutagenesis

目的:建立一种高效而经济的定点突变方法。方法:采用重叠延伸PCR定点突变技术,引物设计时引入目的突变,以前两次PCR产物为模板,进行第三次PCR,即可获得突变后的目的DNA片段。将此片段连入pMDTM18-T载体后测序验证突变结果。结果:DNA测序表明,待突变位点已由ATTGG突变为ATTTT。结论:成功实现了目的位点的定点突变,重叠延伸PCR法是一种高效且经济的定点突变方法。

• 单位
  生殖与干细胞工程研究所; 中南大学; 人类干细胞国家工程研究中心