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摘要
目的探讨整合素连接激酶(ILK)在白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化(TMET)过程中的表达及其意义。方法将体外培养的人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞随机分为4组:1)空白对照组。仅加入DMEM/F12培养基培养细胞。2)白蛋白诱导组。加入含人纯化白蛋白的培养液,白蛋白终浓度为5g·L-1(以下白蛋白终浓度为此浓度)。3)转化生长因子-β1(TGF-β1)中和抗体对照组。加入含TGF-β1中和抗体的培养液,TGF-β1中和抗体终浓度为5μg·L-1(以下TGF-β1中和抗体终浓度为此浓度)。4)TGF-β1拮抗组。在加入人纯化白蛋白15min前加入TGF-β1中和抗体。观察4组细胞形态的变化。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TGF-β1、ILK、纤维连接蛋白(FN)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达水平。结果空白对照组0、12、24和48h时TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA表达水平与TGF-β1中和抗体对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。白蛋白诱导组、TGF-β1拮抗组12、24和48h时TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA表达水平均明显高于同组0h时、空白对照组和TGF-β1中和抗体对照组(均P<0.05);TGF-β1拮抗组12、24和48h时TGF-β1、ILK和FN mRNA表达水平均显著低于白蛋白诱导组(均P<0.01),24、48h时E-cadherin、α-SMA mRNA表达水平均显著低于白蛋白诱导组(均P<0.01)。相关性分析结果显示,ILK mRNA表达与TGF-β1、α-SMA和FN mRNA表达均呈正相关(r=0.944、0.974和0.989,均P<0.01)。结论白蛋白可以诱导HK-2细胞发生转分化,ILK在其中发挥促进作用。
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