摘要
目的:观察靶向可溶性血管内皮生长因子受体(sKDR)对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨KDR基因作为膀胱癌基因治疗靶点的可行性和有效性。方法:将人膀胱癌细胞T24分为sKDR转染组、未转染组和对照组,构建靶向sKDR真核分泌型表达质粒PCI-KDR,经LipofctamineTM2000转染T24细胞,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测能否与VEGF结合,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测稳定表达sKDR的T24细胞KDR基因表达水平,噻唑蓝比色法(MTT)检测sKDR对T24细胞增殖的作用,转移酶末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率,裸鼠皮下移植稳定表达sKDR的T24细胞,观察其成瘤性的改变。结果:与未转染组比较,转染组稳定表达sKDR的T24细胞其KDRmRNA表达水平升高了4.16倍,细胞增殖抑制率增加了55.1%(P<0.01),细胞增殖速度明显缓慢并出现显著的凋亡峰。在裸鼠体内转染组与未转染组上述各项指标比较差异有显著性(P<0.01),转染组肿瘤生长明显缓慢,成瘤能力受抑。结论:靶向sKDR能够在很大程度上抑制膀胱癌T24细胞增殖并促进其凋亡。
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单位吉林大学第二医院