CRMP2过表达及沉默对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响

作者:胡杨; 张宇; 吕俊杰; 薛欢; 高媛媛*
来源:山西医科大学学报, 2021, 52(11): 1447-1451.
DOI:10.13753/j.issn.1007-6611.2021.11.011

摘要

目的探究脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)过表达及沉默对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法将含CRMP2过表达载体、CRMP2空载体、CRMP2沉默载体及CRMP2扰乱载体的慢病毒感染并筛选SH-SY5Y细胞,分别命名为CRMP2过表达组、空载体组、CRMP2沉默组及扰乱载体组。采用荧光检测和Western blot分别验证感染效率和CRMP2过表达及沉默效果。四组细胞均用终浓度为3μmol/L的Aβ25-35孵育处理24 h诱导细胞损伤,采用MTT实验、LDH实验及Hoechst 33258实验分别检测细胞活性、细胞毒性及细胞凋亡。结果荧光检测结果显示,各组慢病毒感染效率均达95%以上。Western blot检测结果显示,与扰乱载体组相比,CRMP2沉默组CRMP2蛋白表达减少(P<0.01)。与空载体组相比,CRMP2过表达组CRMP2蛋白表达增加(P<0.01)。MTT实验、LDH实验及Hoechst 33258实验结果显示,与扰乱载体组相比,CRMP2沉默组细胞活性增加、细胞毒性降低及细胞凋亡减少(均P<0.05);与空载体组相比,CRMP2过表达组细胞活性降低、细胞毒性增加及细胞凋亡增多(均P<0.01)。结论 CRMP2过表达对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有促进作用,CRMP2沉默对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有抑制作用。

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