基于微滴式数字PCR的饮料中嗜酸乳杆菌定量检测

作者：刘洋; 张娜娜; 窦同海; 俞漪; 徐琼; 曲勤凤; 赵渝; 杨捷琳; 朱春梅

来源：中国乳品工业, 2020, 48(10): 47-56.

DOI：10.19827/j.issn1001-2230.2020.10.009

• ddPCR
• 嗜酸乳杆菌
• 定量
• 检测

基于微滴式数字PCR技术(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)建立饮料中嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus strains)的检测方法。以嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR区域的重复序列设计并合成的引物,对其进行条件优化、特异性检测、优化反应体系,并对体系的灵敏度、重复性、抗干扰能力进行验证,最后对市售的实际样品进行检测。结果表明该方法的特异性很好;方法的灵敏度达到了0.25 pg/μL;重复性的标准偏差在2.34%～6.1%之间;在抗干扰检测中,实验组与对照组结果一致性好,提示该方法抗干扰能力较好;对市售的11批次样品进行检测,标记含有嗜酸乳杆菌的样品中均检出嗜酸乳杆菌且含量为1.6×103～2.3×106copies/g。研究建立的ddPCR方法可用于饮料中的嗜酸乳杆菌的快速和精确定量。

• 单位
  生命科学学院; 上海师范大学; 上海市质量监督检验技术研究院