重组携带hIL-10基因的腺病毒载体的构建与鉴定

作者：程剑; 林彬; 钱前; 沈晓洁; 刘艳; 王卫兵

来源：江苏医药, 2012, (23): 2793-2795+2917.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2012.23.007

• 白细胞介素10
• 腺病毒载体
• 大鼠肝细胞 Interleukin-10
• Adenovirus vector
• Rat hepatocytes

目的构建携带人白细胞介素10(hIL-10)基因的腺病毒载体,体外细胞学鉴定其介导的基因表达。方法以pORF-hIL10质粒为模板,PCR扩增hIL-10基因,获得hIL10cDNA片段,酶切并插入线性化pUC19质粒,命名为pUC19-hIL10。再酶切pUC19-hIL10,插入pDC315-EGFP,置换EGFP序列,构建pDC315-hIL10。将质粒pDC315-hIL10和pDC315-EGFP分别共转染至293细胞,产生复制缺陷型重组腺病毒。pDC315-hIL10和pDC315-EGFP分别感染大鼠肝细胞,免疫学方法鉴定目的基因的表达。结果经PCR扩增、鉴定,证明已正确构建重组...

• 单位
  无锡卫生高等职业技术学校; 安徽医科大学