二甲双胍对转化生长因子β1诱导黑素瘤1205Lu细胞上皮-间质转化及侵袭的影响

作者：梁美琪; 梁官钊; 郭健; 段昕所; 陆洁^*

来源：中华皮肤科杂志, 2017, 50(06): 426-430.

• 黑色素瘤
• 二甲双胍
• 转化生长因子β1
• 上皮-间质转化
• 侵袭

目的探讨二甲双胍在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下, 对黑素瘤1205Lu细胞上皮-间质转化(EMT)过程及侵袭的影响。方法体外培养1205Lu细胞, 分3组处理:空白对照组、TGF-β1(5 ng/ml)组、TGF-β1(5 ng/ml)+二甲双胍(1 mmol/L)组。处理48 h后, 显微镜下观察各组细胞形态变化并采集照片。Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力, 采用蛋白质印迹法和实时荧光定量RT-PCR技术分别测定细胞内N-钙黏蛋白及基质金属蛋白酶9(MMP-9)在蛋白质和mRNA水平上的表达, 通过单因素方差分析及LSD-t法对结果进行统计学分析。结果与空白对照组相比, TGF-β1诱导1205Lu细胞向成纤维细胞样形态转变(同上皮-间质转化样改变), 联合二甲双胍可逆转上述形态改变。3组穿膜细胞数为空白对照组194.1 ± 8.295、TGF-β1组412.2 ± 13.427、TGF-β1+二甲双胍组175.3 ± 8.693。N钙黏蛋白水平3组分别为0.603 ± 0.029、1.963 ± 0.016、0.207 ± 0.009, mRNA水平3组分别为1.000 ± 0.000、6.678 ± 0.043、1.035 ± 0.015。MMP-9蛋白水平3组分别为0.575 ± 0.009、1.243 ± 0.027、0.629 ± 0.008, mRNA水平3组分别为1.000 ± 0.000、5.351 ± 0.604、0.930 ± 0.130。结果经方差分析显示, 3组差异有统计学意义(P < 0.05)。结论二甲双胍可显著抑制TGF-β1诱导的黑素瘤1205Lu细胞EMT样形态改变、细胞侵袭及N钙黏蛋白、MMP-9在蛋白和mRNA水平上的表达。

• 单位
  中国医学科学院; 北京协和医学院; 承德医学院附属医院