大鼠骨髓间充质干细胞的分离、鉴定与冻存及对细胞活性的影响

作者：谢晶晶; 李博; 姚兵; 宋烜; 张平超; 陆骅

来源：解放军医药杂志, 2018, 30(05): 1-4.

• 骨髓
• 间充质干细胞
• 低温保存
• 细胞活性

目的分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),观察冻存对细胞活性的影响,为其临床应用奠定基础。方法取3周龄SD雄性大鼠,断颈处死,取股骨和胫骨,提取骨髓MSCs进行体外培养,流式细胞仪鉴定细胞表面的阳性标记物和阴性标记物。所得骨髓MSCs-70℃冻存,分别于冻存前、冻存后1周、1个月、6个月取细胞,采用MTT法绘制骨髓MSCs增殖曲线,采用诱导实验检测骨髓MSCs的成骨细胞与脂肪细胞分化的能力。结果分离大鼠骨髓MSCs表面标志物CD29阳性表达率为97.9%,CD90阳性表达率为97.4%。冻存后1周、1个月和6个月,大鼠骨髓MSCs复苏率差异无统计学意义(P>0.05)。冻存、冻存时间延长对细胞增殖活力及多分化能力,经条件诱导后成钙结节数目和油滴数目组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验成功提取了大鼠骨髓MSCs,配置的冻存体系也可较长时间保持MSCs活性,为其后继研究打下了基础。

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院