非对称RNA干扰抑制CDCA5基因表达对结直肠癌细胞增殖的影响

作者：唐军伟; 彭洪^*; 林中超; 彭明沙; 刘娟

来源：西部医学, 2019, 31(06): 852-856.

• 结直肠癌
• 非对称RNA干扰
• 细胞分裂周期相关蛋白5

目的探讨非对称抑制CDCA5基因的表达对人结直肠癌细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法收集2016年～2017年南充市中心医院行根治性手术的20例结直肠癌患者的癌组织标本及匹配的癌旁正常组织, Western blot检测结直肠癌组织和癌旁正常组织中CDCA5蛋白的表达。同时,Western blot检测结直肠癌细胞系HT29、HCT116及SW480细胞中CDCA5蛋白的表达,选择表达水平最高的细胞系进行后续研究。设计针对CDCA5基因的siRNA,阴性对照siRNA-NC及三条长短不同的非对称小干扰RNA,即aiRNA(15/21)、aiRNA(16/21)和aiRNA(17/21)。PCR检测各组对CDCA5基因的沉默效果。MTT检测siRNA、siRNA-NC和aiRNA(15/21)组的细胞增殖能力,流式细胞仪检测各组细胞周期的变化。结果 CDCA5在结直肠癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。人结直肠癌细胞系HCT116中CDCA5蛋白的表达明显高于HT29和SW480细胞系(P<0.05)。aiRNA(15/21)在各组中有最强的基因沉默效果(P<0.05)。与siRNA和siRNA-NC组相比,aiRNA(15/21)组细胞增殖能力低于其他两组,处于细胞周期G2/M期的细胞数量显著多于其他两组(均P<0.05)。结论 CDCA5可能是治疗结直肠癌的一个重要靶点,基于CDCA5基因的特异性非对称aiRNA(15/21)干扰在沉默效率上优于传统siRNA。

• 单位
  南充市中心医院