高糖抑制miR-126-5p促进肾小管上皮细胞损伤

作者：蒋琼^*; 杨婷; 李兆飞; 邹艳; 李青春; 陈小辉; 何明杰; 钟爱民

来源：中国医师杂志, 2023, 25(12).

• 肾小管上皮细胞
• miR-126-5p
• 细胞凋亡
• 糖尿病肾病

目的探究糖尿病肾病(DN)疾病发展过程中的miRNA差异表达谱, 并且进一步探讨miR-126-5p参与肾小管上皮细胞高糖诱导损伤的作用机制。方法首先, 从基因表达综合数据库(GEO)中下载已有的芯片数据, 依次使用GEO2R、miRanda、基因本体论(GO)分析以及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析对差异miRNA进行数据挖掘。随后, 采用高糖诱导HK-2细胞损伤模型, 再分为3组:高糖模型组、si-HOTAIR组、si-HOTAIR+miR-126-5p inhibitor组, 对3组细胞依次转染siRNA-NC、siRNA-HOTAIR以及siRNA-HOTAIR+miR-126-5p mimic, 并培养于含60 mmol/L葡萄糖的培养基中。流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平变化, CCK-8检测细胞增殖变化。结果通过GEO进行数据挖掘分析发现, 相较于普通小鼠, DN小鼠的肾脏组织中存在74个miRNA表达上调, 80个miRNA表达下调, 富集分析结果表明miRNA可以靶向Wnt、PKG、MAPK以及Rap1等信号通路, 且miR-126-5p显著下调。高糖诱导HK-2细胞损伤模型中, 实验结果表明, 60 mmol/L高糖浓度下细胞增殖活性抑制效果较为显著(P<0.05);高糖刺激会显著降低miR-126-5p的表达(P<0.05)。流式细胞仪结果表明, 与高糖模型组相比, si-HOTAIR组细胞凋亡率显著下降(P<0.05), 而si-HOTAIR+miR-126-5p inhibitor组细胞凋亡率显著上升(P<0.05)。CCK-8实验表明, 与高糖模型组相比, si-HOTAIR组的细胞活力显著上升(P<0.05);而si-HOTAIR+miR-126-5p inhibitor组细胞活力则被抑制(P<0.05)。结论 miR-126-5p可以抑制高糖诱导HK-2细胞凋亡, 保护HK-2细胞。

• 单位
  江西省人民医院