莲子多酚氧化酶的分离与纯化

作者：贺玉珊; 刘小如; 邓泽元; 黄伊宁; 杨小院; 胡蒋宁

来源：食品工业科技, 2016, 37(09): 64-68.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2016.09.004

• 莲子
• 多酚氧化酶
• 分离纯化

由多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)导致的酶促褐变严重影响莲子的外观。本研究旨在探讨莲子PPO的提取纯化方法,为研究其蛋白结构、进一步探究莲子褐变机理提供理论依据。以酶活力和酶比活力为指标,对比了提取PPO的四种方法,发现匀浆吸附后丙酮沉淀法提取莲子PPO可获得较高的酶比活力,达289.04 U/mg;采用单因素实验对该提取方法进行优化,得最佳提取参数为:料液比1∶5、提取时间2 h、p H=7、含2%PVPP和0.8%Triton X-100提取溶液,优化后PPO粗酶液酶比活力为294.40 U/mg;采用DEAE Sepharose Fast FLow阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶柱层析对粗酶液进行纯化,得到分子量大约为58 ku莲子PPO,酶比活力为7926.68 U/mg,纯化倍数为26.92,回收率为38.48%。

• 单位
  南昌大学; 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室