少弱畸形精子症患者H19及MEST基因DNA甲基化分析

作者：张伟娜; 刘志伟; 上官陈燕; 陆军; 刘睿智; 于洋

来源：中华泌尿外科杂志, 2013, 34(06): 422-425.

• 男性不育
• 精子发生
• 基因转变
• 甲基化印记

目的比较正常生育男性及少弱畸形精子症患者父系印记基因H19及母系印记基因MEST DNA甲基化的差异。方法对2011年3月至2012年2月15例正常生育男性和33例少弱畸形精子症患者精液标本进行常规分析和精子形态分析。密度梯度离心法提纯精液,提取精液基因组DNA并进行亚硫酸氢盐处理,利用PCR体外扩增并将纯化后的PCR产物与pMD(?)18-T载体连接及酶切验证,并对阳性克隆进行测序和DNA甲基化程度差异分析。结果正常生育男性H19DNA高甲基化5例,甲基化率为100.0%,10例少弱畸形精子症患者DNA甲基化水平显著下降,甲基化率为93.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。正常生育男性MEST DNA低甲基化10例,甲基化率为1.6%,23例少弱畸形精子症患者DNA甲基化率为4.8%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论H19差异甲基化区域的甲基化异常和男性不育有关,可能成为人类精子形成缺陷的生物学标志之一。

• 单位
  东北师范大学; 吉林大学第一医院