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摘要
目的探讨miR-654对肝癌细胞的恶性生物学行为的影响及分子机制。方法收集肝癌患者的肝癌组织和癌旁组织,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-654表达水平;HepG2细胞随机分为anti-miR-NC组、anti-miR-654组、anti-miR-654+si-NC组、anti-miR-654+si-FHIT组;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞活性;流式细胞术检测HepG2细胞的凋亡情况;Transwell检测HepG2细胞的迁移和侵袭数目;双荧光素酶报告实验检测miR-654和FHIT的靶向关系。结果肝癌组织中miR-654表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。转染anti-miR-NC、anti-miR-654后,anti-miR-654组miR-654的表达水平显著低于anti-miR-NC组(P<0.05)。anti-miR-654组48 h及72 h细胞活性及细胞周期蛋白(Cyclin)D1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2表达水平显著低于anti-miR-NC组,而细胞凋亡率和p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平显著高于anti-miR-NC组(均P<0.05),anti-miR-654组HepG2细胞的迁移和侵袭数目、基质金属蛋白酶(MMP)-2表达水平均显著低于anti-miR-NC组,而钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达水平显著高于anti-miR-NC组(均P<0.05)。WT-FHIT与miR-654共转染后HepG2细胞的荧光素酶活性显著低于WT-FHIT与miR-NC共转染的细胞(P<0.05)。miR-654组FHIT表达水平显著低于miR-NC组(P<0.05);anti-miR-654组FHIT表达水平显著高于anti-miR-NC组(P<0.05)。anti-miR-654+si-FHIT组48 h及72 h细胞活性及CyclinD1、Bcl-2表达水平显著高于anti-miR-654+si-NC组,而细胞凋亡率及FHIT、p21、Bax表达水平显著低于anti-miR-654+si-NC组(均P<0.05),anti-miR-654+si-FHIT组HepG2细胞迁移和侵袭数目及MMP-2表达水平显著高于anti-miR-654+si-NC组,E-cadherin表达水平显著低于anti-miR-654+si-NC组(均P<0.05)。结论抑制miR-654表达可能通过上调FHIT抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。
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