摘要
目的 探讨磷酸蛋白磷酸酶催化亚基(PPP5C)对人肺腺癌H1299细胞迁移侵袭能力及肿瘤干性的影响及机制。方法 构建PPP5C-pcDNA3.1过表达载体,转染PPP5C-pcDNA3.1和pcDNA3.1至H1299细胞,遗传霉素(G418)筛选H1299稳转细胞系。qRT-PCR和Western blot法鉴定PPP5C mRNA和蛋白的表达水平,细胞生长曲线绘制和克隆形成实验检测细胞增殖活性;划痕和Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力;诱导干细胞成球实验检测细胞干性。结果 成功构建PPP5C-pcDNA3.1真核表达载体,转染H1299细胞后PPP5C的表达水平显著升高。H1299细胞过表达PPP5C后,生长曲线和克隆形成实验结果显示细胞增殖能力无变化;划痕和Transwell实验显示细胞迁移和侵袭能力显著增强,基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达升高;干细胞成球结果显示细胞干性显著增强,性别决定区Y-box 2(SOX2)的表达升高。结论 人肺腺癌细胞H1299中过表达PPP5C不影响细胞增殖,但可通过调控MMP9和SOX2来增强其迁移侵袭能力及肿瘤干性。
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