丹酚酸A抑制NF-κB信号通路减轻脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应

作者：黄贝; 张雯; 宋俊科; 张丽; 杜立达; 毕研才; 岳义松; 杨海光; 杜冠华^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2023, 37(04): 241-248.

DOI：10.3867/j.issn.1000-3002.2023.04.001

• 丹酚酸A
• NF-κB
• 脂多糖
• BV2小胶质细胞
• 炎症

目的 利用脂多糖(LPS)刺激BV2小胶质细胞构建体外神经炎症模型，探讨丹酚酸A(SalA)对神经炎症的抑制作用及机制。方法 (1) BV2细胞分为细胞对照组(正常培养24 h)、LPS(1 mg·L-1孵育24 h)组、SalA(0.01,0.05,0.5,5,10和20μmol·L-1培养24 h)组和LPS+SalA(加入LPS 1 mg·L-1及SalA 0.01,0.05,0.5,5,10和20μmol·L-1共同培养24 h)组，MTT法检测细胞存活率。(2)除LPS+SalA组SalA给药浓度为0.05,0.5和5μmol·L-1外，其他分组处理同方法(1)。Griess法检测BV2细胞一氧化氮(NO)分泌水平，ELISA检测BV2细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6分泌水平，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达水平，Western印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平及NF-κB P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)的磷酸化水平，免疫荧光法检测iNOS蛋白表达及NF-κB P65的核转位。结果 (1)与细胞对照组相比，LPS 1 mg·L-1和SalA 0.01～20μmol·L-1对BV2细胞存活率无显著影响。(2)与细胞对照组相比，LPS 1 mg·L-1组NO分泌水平显著升高(P<0.01),TNF-α,IL-1β和IL-6分泌及mRNA表达水平显著上升(P<0.01),iNOS表达水平及NF-κB P65和IκBα磷酸化水平显著升高(P<0.01)，且iNOS和NF-κB P65蛋白免疫荧光强度显著升高(P<0.01)；与LPS 1 mg·L-1组相比，SalA5μmol·L-1可使NO表达水平显著降低(P<0.01),TNF-α,IL-1β和IL-6分泌及mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。SalA 0.5和5μmol·L-1可使iNOS表达水平及NF-κB P65和IκBα磷酸化水平显著降低(P<0.05,P<0.01)，且iNOS和NF-κB P65蛋白免疫荧光强度明显降低(P<0.01)。结论 SalA通过抑制NF-κB信号通路减轻LPS刺激引起的BV2细胞炎症反应。

• 单位
  中国医学科学院; 药物研究所; 北京协和医学院