CDK4/6抑制剂哌柏西利对人黑素瘤细胞增殖、周期和凋亡的影响

作者：邓龙; 徐敏; 付蕾; 杜冠群; 王利^*

来源：肿瘤, 2020, 40(08): 521-530.

DOI：10.3781/j.issn.1000-7431.2020.11.853

• 黑素瘤
• 实验性
• 动物实验
• 哌柏西利
• 细胞增殖
• 细胞周期检测点

目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinases 4/6,CDK4/6)抑制剂哌柏西利对人恶性黑素瘤SK-MEL-5和A375细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:体外培养人黑素瘤A2058、SK-MEL-5和A375细胞,以耐药A2058细胞作为阴性对照。用不同浓度的哌柏西利处理细胞24和48 h后,采用CellTiter-Glo~?发光法检测哌柏西利对A2058、SK-MEL-5和A375细胞增殖的影响。碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色后检测哌柏西利对A2058、SK-MEL-5和A375细胞周期的影响,蛋白质印迹法检测哌柏西利对SK-MEL-5和A375细胞中细胞周期相关蛋白[CDK4、CDK6、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,Rb)和磷酸化Rb(phospho-Rb,p-Rb)]表达的影响。AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测哌柏西利对A2058、SK-MEL-5和A375细胞凋亡的影响。采用NOD/SCID小鼠建立A2058、SK-MEL-5和A375细胞的皮下移植瘤模型,将小鼠分为2组[哌柏西利(80 mg/kg)处理组和乳酸钠缓冲液处理组],通过体内实验验证哌柏西利的安全性和疗效。结果:与阴性对照A2058细胞相比,哌柏西利对SK-MEL-5和A375细胞的增殖具有明显抑制作用(P值均<0.001)。哌柏西利能够引起SK-MEL-5和A375细胞中G1期细胞所占比例增高(P值均<0.05);蛋白质印迹法检测发现哌柏西利能够使SK-MEL-5和A375细胞中细胞周期G1/S期检查点关键蛋白CDK4、CDK6、cyclin D1以及p-Rb的表达水平明显下调(P值均<0.001)。哌柏西利对A2058、SK-MEL-5和A375细胞均未见明显的促凋亡作用(P值均>0.05)。在荷瘤小鼠模型中,哌柏西利安全性高,对小鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用[对SK-MEL-5细胞移植瘤的抑制率为(64.6±9.8)%,对A375细胞移植瘤的抑制率为(76.3±6.6)%](P值均<0.001)。结论:哌柏西利对黑素瘤SK-MEL-5和A375细胞的增殖具有明显抑制作用,可引起细胞周期G1期阻滞。

• 单位
  中国人民解放军总医院