猪圆环病毒3型SYBR greenⅠ荧光定量PCR方法建立及初步应用

作者：吕素芳; 李峰; 郭广君; 魏凤; 张文通; 沈志强^*

来源：中国兽医学报, 2019, 39(07): 1250-1255.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.07.02

• 猪圆环病毒3型
• cap基因
• 实时定量PCR反应

为建立一种快速、特异、敏感的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,检测猪圆环病毒3型(PCV3)在感染猪体内的分布情况和病毒含量,本研究根据PCV3的cap基因序列设计1对引物,对反应条件、反应体系进行优化,建立了检测PCV3 cap基因的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,并对动物回归试验后剖检的病料组织进行了检测。结果,该方法比传统PCR方法灵敏度高100倍,可达3.04×102拷贝/μL,且具有良好的特异性和重复性。在不同病料组织中均可检测到PCV3,但不同感染猪、不同组织病毒检出及含量有差异,其中肝脏、肺脏、颌下淋巴结中病毒含量显著高于心脏、心包肌、肾脏等;肝中病毒拷贝数最高,达1.16×106拷贝/μL,表明PCV3具有一定的组织嗜性。该方法可用于PCV3的病原学监测、流行病学调查及定量研究。

• 单位
  山东省滨州畜牧兽医研究院; 山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心