人IL-18基因克隆及表达

作者：李曼妮; 苏先狮; 杨春艳

来源：临床肝胆病杂志, 2009, (04): 264-266.

• PBMC
• IL-18
• RT-PCR
• 基因克隆
• 重组表达 PBMC
• Interleukin-18
• RT-PCR
• Gene clone
• Reconbinant expression

目的克隆人IL-18编码区cDNA,研究其在大肠杆菌中的表达。方法应用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出成熟(hIL-18)cDNA。利用基因重组技术构建IL-18的原核重组表达质粒pGEX-3X-hIL-18,转化E.coli JM109,以IPTG诱导培养,收集菌体直接进行SDS-PAGE分析。结果经测序证实获得人IL-18的cDNA序列与文献报道的cDNA完全一致;携此重组质粒pGEX-3X-hIL-18的大肠杆菌经IPTG诱导,表达了分子量为43kD的重组融合蛋白。结论克隆了人IL-18cDNA,利用大肠杆菌成功地表达了重组蛋白。为进一步探讨人IL-18的生物学作...

• 单位
  广东省公安边防总队医院; 中南大学湘雅二医院