SPAG6促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭

作者:吕灵璐; 付国庆; 胡恋; 岳君秋; 聂磊; 李为; 张志兵; 张玲
来源:现代肿瘤医学, 2023, 31(05): 811-817.
DOI:10.3969/j.issn.1672-4992.2023.05.005

摘要

目的:探讨抑制精子相关抗原6(sperm-associated antigen 6,SPAG6)对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:体外培养正常卵巢上皮细胞(NOE-71)和卵巢癌细胞(SKOV-3、OVCAR-3),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测细胞中SPAG6基因的表达。将4种潜在抑制SPAG6基因表达的“SPAG6-shRNA”质粒分别转染到SKOV-3细胞,RT-qPCR和Western blot实验筛选有效抑制SPAG6基因表达的细胞株;采用细胞计数法和平板克隆实验检测抑制SPAG6基因表达对卵巢癌细胞增殖的影响;运用细胞划痕实验和Transwell实验检测抑制SPAG6基因表达对细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞实验检测抑制SPAG6基因表达对细胞周期的影响;免疫荧光实验和Western blot检测在SKOV-3细胞中抑制SPAG6表达对p27kip1分布的影响。结果:SPAG6基因在卵巢癌细胞SKOV-3和OVCAR-3中的表达均显著高于正常卵巢上皮细胞NOE-71,且在SKOV-3细胞中表达最强。RT-qPCR和Western blot实验显示2种“SPAG6-shRNA”质粒能够有效抑制SKOV-3细胞中SPAG6基因的表达;与对照组细胞相比,抑制SPAG6基因表达能够降低SKOV-3细胞的增殖,差异有统计学意义(P0/G1期显著上调,S期显著下调(Pkip1的水平而增加细胞核中p27kip1的水平。结论:SPAG6促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

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