山羊RAPD反应条件的研究

作者:陈祥; 张勇; 李国红; 廖正录; 简承松; 魏泓
来源:贵州农业科学, 2004, (04): 11-13.

摘要

以贵州山羊为材料 ,研究了MgCl2 浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、TaqDNA聚合酶用量对RAPD反应的影响 ,建立了一套适合山羊的最佳RAPD反应体系。反应总体积为 2 5 μl ,MgCl2 浓度 2 .0mmol/L ,引物为 1 8.75ng ,dNTP浓度 0 .32mmol/L ,模板DNA为 1 5ng ,TaqDNA聚合酶为 2U。PCR反应程序为 :94℃ 3min ;94℃ 1min ,38℃ 1min ,72℃ 2min ,40Cycles ;72℃ 1 0min。