重组磷脂酶A2受体串联显性表位免疫吸附去除原发性膜性肾病中抗磷脂酶A2受体自身抗体

作者：王可昕; 刘书馨; 姬芳玲; 钱嘉航; 任军; 韩璐璐; 贾凌云^*

来源：中华肾脏病杂志, 2023, 39(11).

• 肾小球肾炎, 膜性
• 受体, 磷脂酶A2
• 自身抗体
• 抗磷脂酶A2受体自身抗体
• 免疫吸附

目的探究重组磷脂酶A2受体(phospholipase A2 receptor, PLA2R)串联显性表位(PLA2RTD)在去除原发性膜性肾病(primary membranous nephropathy, PMN)抗PLA2R自身抗体(anti-PLA2R)中的作用。方法在杆状病毒穿梭载体-昆虫细胞体系中表达重组蛋白分子PLA2RTD(富含半胱氨酸结构域、C型凝集素样结构域1和C型凝集素样结构域7), 圆二色谱法测定PLA2RTD的二级结构, 酶联免疫吸附测定法和免疫荧光法测定PLA2RTD的生物活性, 环氧活化法耦联重组PLA2RTD与琼脂糖凝胶CL-6B微球以制备anti-PLA2R的特异性免疫吸附剂。结果该研究实现了PLA2RTD在杆状病毒穿梭载体-昆虫细胞系统中的首次表达, 证明了PLA2RTD具有良好的免疫原性和较高的结合特异性。PLA2RTD免疫吸附剂体外单次吸附可平均消除76.66%的anti-PLA2R[(6.66±0.30)RU/ml比(28.54±2.10)RU/ml], 吸附完成后血浆中IgG、IgA、白蛋白、β2微球蛋白、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的含量变化<4%, 第2～3次重复使用时仍可保持65%左右的吸附效率。结论基于PLA2RTD的特异性免疫吸附剂能够有效地清除血浆中anti-PLA2R, 为特异性清除与PMN相关的自身抗体提供了一种新途径。

• 单位
  大连市中心医院; 大连理工大学; 生物工程学院