抑制Caspase-1活化能减弱玉米赤霉烯酮诱导的猪小肠上皮细胞凋亡

作者：宋超; 任晓丽; 靳双星; 皇甫和平; 董青; 李新锋; 张爱国; 石冬梅; 王俊东; 彭巍^*; 张曼^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(12): 1600-1608.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0209

• 玉米赤霉烯酮
• 活性氧
• 胱天蛋白酶-1
• 细胞焦亡
• 凋亡

为探究玉米赤霉烯酮（ZEA）对猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）毒性机制中细胞焦亡与凋亡间的关系，用不同质量浓度的ZEA(0、5、10、15μg/m L)处理细胞24 h以及ZEA(15μg/m L)与乙酰半胱氨酸（NAC,1 mmol/L）或Z-YVAD-FMK(10μmol/L)联合作用24 h。采用CCK-8法检测存活率；微板法测定细胞上清中乳酸脱氢酶（LDH）含量水平；免疫印迹检测剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)蛋白水平；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA测定白细胞介素（IL）-18和IL-1β水平；流式细胞术检测活性氧（ROS）水平和细胞凋亡率；免疫荧光检测Caspase-3表达水平。结果显示，ZEA引起IPEC-J2细胞存活率降低和LDH含量升高，呈剂量依赖性（P<0.05,P<0.01）。与0μg/m L组比较，ZEA处理后细胞中剪切的Caspase-1、IL-18和IL-1β水平均明显升高（P<0.05,P<0.01）。NAC孵育显著降低了ZEA处理细胞的ROS水平、剪切的Caspase-1蛋白表达以及IL-18和IL-1β含量，较ZEA组差异显著（P<0.01）。与ZEA组相比，Z-YVAD-FMK+ZEA组细胞存活率明显升高（P<0.01），而LDH含量、Caspase-3表达以及细胞凋亡水平则显著降低（P<0.01）。结果表明，活化的Caspase-1参与了ZEA诱导的IPEC-J2细胞凋亡。

• 单位
  医药学院; 河南牧业经济学院; 青海省畜牧兽医科学院