犬细小病毒颗粒疫苗的研制与免疫效果评价

作者：李昀真; 代昕宇; 李双双; 许丽文; 张成琪; 胡博; 白雪^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(12): 1516-1522.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0206

• 犬细小病毒
• 新型疫苗
• 病毒样颗粒
• 杆状病毒

犬细小病毒性肠炎是由犬细小病毒(CPV)引起的一种高度传染性疾病,目前最为有效的防控方法为疫苗接种。本研究将CPV VP2基因克隆于pQB3载体中,将鉴定正确的pQB3-VP2重组质粒与qBac-ⅢG杆粒共转染至sf9昆虫细胞中,拯救获得表达CPV VP2蛋白和绿色荧光蛋白的重组杆状病毒rBac-VP2。rBac-VP2感染sf9细胞可出现明显的细胞病变,在荧光显微镜下可见明显的绿色荧光,间接免疫荧光鉴定显示rBac-VP2感染的sf9细胞可见明显的红色荧光。对细胞表达的VP2蛋白进行Western-blot鉴定,结果显示在约65 ku处可见明显的目标蛋白条带,电镜下可见与天然细小病毒形态大小相似的粒子,表明rBac-VP2感染昆虫细胞后可组装形成病毒样颗粒(VLPs),收获的VLPs血凝效价可达1∶210。将CPV VLPs免疫小鼠后诱导机体产生血凝抑制抗体,效价达1∶27,与宠必威幼犬保商业化疫苗产生的免疫效果相当。本研究为犬细小病毒新型基因工程疫苗的研制奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院特产研究所