摘要
利用动物线粒体12S rRNA和16S rRNA基因序列片段对动物角制品进行种属鉴别,为DNA条形码技术在角制品分子鉴定提供有效方法。收集犀牛角、水牛角、黄牛角和山羊角作为研究材料,采用优化提取步骤的商业化提取试剂盒进行基因组DNA的提取,以提高基因组DNA的浓度及质量。采用PCR扩增及测序技术获得所有样本12S rRNA和16S rRNA基因部分序列,使用Blast程序分别进行序列比对分析,通过下载Genbank相关物种的12S rRNA和16S rRNA序列,分别比较两个基因片段种内和种间距离,分别构建系统进化树。结果显示,12S rRNA序列所有样本扩增成功,16S rRNA序列仅犀牛角和黄牛角扩增成功。遗传距离分析显示各检材种间差异均大于种内差异,收集检材在12S rRNA和16S rRNA引物构建的进化树中表现出良好的单系性和较高的置信度。表明12S rRNA基因片段的DNA条形码技术对动物角制品及其它混伪品具有更好的鉴别能力,可提高物种鉴定的准确性和灵敏度。
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单位辽东学院