2种桑树病原真菌多重PCR检测方法的建立

作者：罗龙辉; 张兴楠; 孟芳; 黄裕鑫; 刘吉平

来源：华南农业大学学报, 2022, 43(05): 54-60.

• 桑树
• 褐斑病
• 轮纹病
• 新褐斑壳丰孢
• 膝节霉
• 多重PCR

【目的】褐斑病与轮纹病是桑树Morus alba的2种常见真菌性病害，危害严重，给生产上带来极大损失。本研究旨在快速准确地诊断2种病害的主要病原菌新褐斑壳丰孢Neophloeospora maculans与膝节霉Gonatophragmium triuniae。【方法】基于多重PCR原理，针对2种病原菌的核糖体内转录间隔区(Internal transcribed spacer, ITS)序列设计多重PCR的特异性引物，优化多重PCR反应的条件，并通过对45份不同地区桑树褐斑病与轮纹病样本进行检测以验证所建立的多重PCR的可行性。【结果】建立的多重PCR检测体系具有良好的可操作性，特异性良好，2种病原菌的DNA检测灵敏度分别达0.1和1.0 pg/μL，通过对不同地区的田间收集的多份桑树病样进行检测，可以明显区分出不同地区2种病害病原菌的种类。【结论】所建立的多重PCR技术可用于桑树褐斑病与轮纹病病原菌的快速检测，可为桑树真菌性病害的防控建立基础。