黄芪甲苷对miRNA-1过表达诱导大鼠心力衰竭的保护作用及其机制

作者：黄悦; 王秋宁; 杨雪峰; 陶贵周^*

来源：吉林大学学报(医学版), 2021, 47(06): 1437-1445.

DOI：10.13481/j.1671-587X.20210613

• 黄芪甲苷
• 微小RNA1
• 心力衰竭
• 钙离子
• 兰尼碱受体

目的:研究黄芪甲苷(ASⅣ)对微小RNA-1 (miRNA-1)过表达诱导大鼠心力衰竭(HF)的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常对照组、miRNA-1mimics阴性病毒对照(miRNA-1 mimics NC)组、miRNA-1 mimics组和ASⅣ+miRNA-1组,每组8只。通过左心室壁注射miRNA-1慢病毒建立大鼠HF模型。超声心动图检测各组大鼠左心室射血分数(EF)和左心室短轴缩短率(FS),实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组大鼠心肌组织中miRNA-1表达水平。将H9C2心肌细胞分为正常对照组、miRNA-1 mimics阴性病毒对照(miRNA-1mimics NC)组、miRNA-1 mimics组和ASⅣ+miRNA-1 mimics组。采用miRNA-1慢病毒感染H9C2心肌细胞,RT-qPCR法检测H9C2心肌细胞中miRNA-1表达水平,MTT法测定各组大鼠H9C2心肌细胞存活率并筛选ASⅣ的最适浓度,钙测试盒检测各组大鼠心肌H9C2细胞中钙离子(Ca2+)水平,RT-qPCR法检测各组大鼠心肌H9C2细胞中钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和兰尼碱受体2 (RyR2) mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠心肌H9C2细胞中CaMKⅡ和RyR2蛋白表达水平。结果:与正常对照组和miRNA-1 mimics NC组比较,miRNA-1 mimics组大鼠心肌组织中miRNA-1表达水平明显升高(P<0.01), EF和FS明显降低(P<0.01);与miRNA-1mimics组比较,ASⅣ+miRNA-1 mimics组大鼠心肌组织中miRNA-1表达水平明显降低(P<0.01),EF和FS明显升高(P<0.01)。与正常对照组和miRNA-1 mimics NC组比较,miRNA-1 mimics组大鼠H9C2心肌细胞中miRNA-1表达水平和Ca2+水平明显升高(P<0.01),CaMKⅡmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01), RyR2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与miRNA-1mimics组比较,ASⅣ+miRNA-1 mimics组大鼠H9C2心肌细胞中miRNA-1表达水平、Ca2+水平和CaMKⅡmRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01), RyR2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论:ASⅣ可能是通过下调miRNA-1的表达,参与心肌细胞中Ca2+水平的调控,进而改善HF,起到心脏保护作用。

• 单位
  基础医学院; 锦州医科大学