基于夹心免疫分析的抗体微阵列的构建

作者：吕林莉; 刘必成; 朱颖; 陆祖宏

来源：中国生物工程杂志, 2008, 28(9): 83-88.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8135.2008.09.014

• 蛋白质芯片
• 抗体微阵列
• 免疫分析

目的:建立一种基于夹心免疫分析的抗体微阵列构建的优化方法.方法:将MCP-1的捕获抗体点样于修饰后的玻片,标准抗原加样覆盖所点阵列,生物素标记抗体和链酶亲和素-cy3依次加样孵育, 激光共聚焦扫描仪获取图象并进行数据分析.对捕获抗体浓度、封闭液种类、系统可重复性和定量检测能力、两种因子平行性检测对信号分析的影响及点样后玻片稳定性进行分析和评价.结果:随着捕获抗体浓度的升高,信号强度逐渐增加;2% BSA/PBS和5% 酪蛋白可作为本系统的封闭液;所构建系统具有较好的可重复性(组内变异 1.3%,组间变异8.7%)和定量分析能力(所建立的抗原浓度-相对信号强度标准曲线相关系数达0.9995);并实现了两因子的平行性分析和点样后玻片的稳定性.结论:确立了基于夹心免疫分析的抗体微阵列构建的优化方法,为进一步构建多因子定量检测抗体微阵列奠定了基础.

• 单位
  生物电子学国家重点实验室; 东南大学附属中大医院; 东南大学