重组腺病毒介导HGF修饰ADSCs对大鼠肝损伤模型的治疗作用

作者：李俊杰; 尹文; 洪楠; 赵威

来源：现代生物医学进展, 2014, 14(06): 1043-1047.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2014.06.012

• 脂肪源性干细胞
• 肝细胞生长因子
• 肝损伤
• 细胞治疗

目的:建立重组腺病毒介导肝细胞生长因子HGF促ADSCs定向分化肝细胞的方法,并对其参与肝损伤修复能力进行验证,为作为治疗肝损伤细胞来源提供参考。方法:采用消化培养的方法,分离SD大鼠腹股沟脂肪组织ADSCs细胞,连续传代3次对其进行纯化培养,利用形态学鉴定、流式细胞术检测ADSCs表面标志物方法对其间充质干细胞样特征进行鉴定,加入成脂肪细胞诱导液观察其分化成脂肪细胞的能力;构建腺病毒表达HGF载体Adeno-HGF-EGFP,并转染ADSCs细胞,利用免疫细胞化学染色方法检测肝细胞标志分子表达水平;最后建立大鼠肝损伤动物模型,观察Adeno-HGF-EGFP转染的ADSCs细胞参与肝损伤修复能力情况。结果:分离的ADSCs细胞形态较为一致,绝大多数呈梭形,排列不规则。流式细胞术结果显示,该细胞表达CD29、CD90、CD106等间充质干细胞细胞表面标记物,低表达造血干细胞细胞表面标记物CD34、CD45,同时,分离的ADSCs细胞具有诱导分化成脂肪细胞能力;Adeno-HGF-EGFP转染ADSCs后,AFP、ALB、CK18等肝细胞特异性分子表达水平升高;经尾静脉注射ADSCs细胞后,肝损伤大鼠的AST、ALT、TBIL等分子表达水平恢复正常。结论:建立了重组腺病毒介导肝细胞生长因子HGF促ADSCs定向分化肝细胞的方法,并且表达HGF的ADSCs细胞具有修复大鼠肝损伤模型能力,这为通过细胞治疗肝损伤提供了新的细胞来源。

• 单位
  军事医学科学院; 第四军医大学; 西京医院