小RNA干扰MMP-2基因表达对结直肠癌细胞生物学特性的影响

作者：刘秀兰; 陈世杰

来源：蚌埠医学院学报, 2019, 44(10): 1305-1309.

DOI：10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.10.003

• 结直肠肿瘤
• 基质金属蛋白酶2
• 小RNA干扰
• Wnt/β-catenin信号通路

目的:探讨小RNA干扰基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达对结直肠癌细胞生物学特性的影响。方法:收集结直肠癌病人的结直肠癌组织及正常的癌旁组织,Western blotting检测MMP-2表达水平。取结直肠癌细胞SW620作为对照组,将MMP-2 siRNA、siRNA control转染至结直肠癌细胞中,Western blotting检测转染48 h后MMP-2 siRNA组、siRNA control组和对照组细胞中MMP-2水平,MTT法检测各组细胞存活情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡变化,Western blotting检测各组细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、β-连环蛋白(β-catenin)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、下游靶基因C-myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)水平。结直肠癌细胞与Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535作用后,测定抑制剂组和未处理组(不加抑制剂)细胞增殖、凋亡变化,同时检测细胞中Bcl-2、β-catenin、Bax、C-myc、cyclin D1蛋白变化。结果:结直肠癌组织中MMP-2蛋白表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01)。MMP-2 siRNA组MMP-2水平均低于对照组和siRNA control组(P<0.05),细胞存活率低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率均高于对照组和siRNA control组(P<0.05)。Bcl-2、β-catenin、C-myc、cyclin D1水平均低于对照组和siRNA control组(P<0.05),Bax水平均高于对照组和siRNA control组(P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路抑制剂作用后,抑制剂组细胞存活率低于未处理组(P<0.05),细胞凋亡率高于未处理组(P<0.05),Bcl-2、β-catenin、C-myc、cyclin D1水平均明显低于未处理组(P<0.01),Bax水平明显高于未处理组(P<0.01),与转染MMP-2 siRNA的结直肠癌细胞一致。结论:MMP-2在结直肠癌组织中表达上调,抑制MMP-2的结直肠癌细胞增殖受到抑制,凋亡增多,其作用机制与Wnt/β-catenin信号通路有关。