摘要

MYB (Myeloblastosis)转录因子广泛参与植物次生代谢产物调控、细胞形态建成、逆境响应及生长发育等过程,同时也是植物原花青素生物合成过程中重要的调控因子。前期研究中,从芒果LAR基因酵母文库筛选中分离获得一个R1型MYB转录因子,命名为MiR1MYB1。为了研究芒果果实中原花青素合成机理,本研究通过PCR克隆获得MiR1MYB1 cDNA全长序列,其全长为1 436 bp,开放阅读框为849 bp,编码282个氨基酸,蛋白分子量为31.25 kD,等电点为9.33。系统发育分析显示MiR1MYB1蛋白与黄林木具有较近的亲缘关系。将其序列定向克隆到酵母表达载体pNC-GBKT7并转化酵母Y2H Gold感受态细胞。对诱饵质粒进行自激活和毒性检测,pNC-GBKT7-MiR1MYB1没有自激活活性和毒性。此表达载体的构建也为后续筛选互作蛋白提供基础。