吡法齐明与贝达喹啉协同作用及机制的初步研究

作者：刘海婷; 李东硕; 张蕾; 王宁; 王彬; 丁杨明; 姚蓉; 陆宇^*

来源：中国防痨杂志, 2022, 44(07): 646-653.

DOI：10.19982/j.issn.1000-6621.20220007

• 抗结核药
• 药物相互作用
• 分枝杆菌,结核
• 吡法齐明
• 贝达喹啉

目的:评价吡法齐明(pyrifazimine, TBI-166)与贝达喹啉(bedaquiline, Bdq)、莫西沙星(moxifloxacin, Mfx)、德拉马尼(delamanid, Dlm)、SQ109及PBTZ169的两药组合对结核分枝杆菌(MTB)临床分离株的相互作用，并初步探讨TBI-166与Bdq的协同作用机制，为TBI-166联合用药提供依据。方法:选取MTB标准株H37Rv(ATCC 27294)、2株药物敏感型MTB临床分离株(菌株编号：30031和30091),以及1株前广泛耐药结核分枝杆菌临床分离株(菌株编号：13385),应用棋盘法测定TBI-166与Bdq、Mfx、Dlm、SQ109、PBTZ169两药组合对临床分离菌株的相互作用；应用时间杀菌曲线法评估具有协同作用的两药组合的抗菌活性；采用细菌活性氧(ROS)检测试剂盒及三磷酸腺苷(ATP)检测试剂盒分别测定不同浓度的TBI-166和Bdq处理H37Rv标准株24 h后菌体内的ROS及ATP水平的变化。结果:与Bdq联用后，TBI-166对MTB临床分离株30031、30091及13385的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)分别为0.08、0.05、0.08μg/ml,均降至TBI-166单药MIC值的1/2。TBI-166与Bdq的两药组合对菌株30031、30091及13385的分级抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index, FICI)值分别为1.00、0.75、1.00。时间杀菌曲线法结果显示，TBI-166与Bdq的两药组合与菌株30031、30091及13385作用14 d后与TBI-166单药应用时相比活菌量分别减少1.59 log10 CFU/ml、1.27 log10 CFU/ml、1.70 log10 CFU/ml。0.4μg/ml TBI-166与0.3μg/ml Bdq联用作用于H37Rv标准株24 h后菌体内ATP含量(相对光单位值为115 160.67±19 129.79)与0.3μg/ml Bdq(相对光单位值为208 599.20±24 078.74)相比，明显下降，差异有统计学意义(F=75.109,P=0.013);而ROS含量(荧光值为21 014.33±1189.19)与0.3μg/ml Bdq(荧光值为13 715.00±907.93)相比明显升高，差异有统计学意义(F=115.403,P<0.001)。结论:TBI-166与Bdq联用具有协同杀菌活性，并且其协同杀菌机制可能与ROS进一步累积及ATP合成受阻有关。

• 单位
  首都医科大学附属北京胸科医院; 北京市结核病胸部肿瘤研究所