大熊猫轮状病毒PCR检测方法的建立及应用

作者：苏小艳; 李林; 燕霞; 张东升; 侯蓉^*; 刘颂蕊^*

来源：兽类学报, 2021, 41(03): 254-260.

DOI：10.16829/j.slxb.150454

• 大熊猫轮状病毒
• PCR检测
• Vp7基因
• 质粒构建

轮状病毒是威胁大熊猫健康的主要病原微生物之一。为了对大熊猫轮状病毒进行快速、方便且准确地检测,研发适合于基层饲养单位和保护区的检测方法是非常有必要的。本研究通过合成大熊猫轮状病毒Vp7基因序列,构建了PUC-VP7的重组质粒,并将其作为阳性对照对大熊猫轮状病毒样本进行PCR检测和分析。结果表明,在进行PCR扩增分析时,该质粒和病毒cDNA二者均在340 bp处出现了特异性条带。此外,对收集到的45份大熊猫粪便样本进行轮状病毒抗原检测时,其中2份样品在340 bp处出现条带,该基因片段与大熊猫轮状病毒CH-1株的相似性为99.89%。本研究构建的PUC-VP7质粒不但可以作为大熊猫轮状病毒PCR检测中的阳性质控品,而且还能有效地促进该PCR病毒检测技术在基层饲养单位和保护区的推广和应用。

• 单位
  四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室; 成都大熊猫繁育研究基地