透明颤菌血红蛋白基因(vgb)与monellin基因在毕赤酵母中的联合表达

作者：王清路; 张玉军; 窦烨; 李俏俏; 周彩霞

来源：中国酿造, 2008, (15): 37-40.

• 透明颤菌血红蛋白基因
• 甜蛋白基因
• 毕赤酵母
• 拷贝数
• 外源基因

根据酵母偏爱密码子合成了monellin甜蛋白基因和vgb基因,然后构建了2种不同方式表达的载体,胞内表达的pPIC3.5KV和分泌表达的pPIC9KM。电击转化得到重组子GS115/pPIC9KM和GS115/pPIC9KM/pPIC3.5KV,通过PCR、SDS-PAGE及western blotting检测发现monellin甜蛋白基因和vgb基因成功整合进毕赤酵母基因组并成功表达,通过品尝和CO-差示光谱法证实其表达产物具有活性,用southern blotting对6株高产菌株进行拷贝数分析并未发现拷贝数与分泌蛋白产量之间存在明显的正相关。对比发现,含vgb基因菌株比未含菌株高甜度monellin的产量最高提高了20%,菌体密度平均提高了9%。

• 单位
  山东万杰医学院; 生物化学教研室