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摘要
旨在研究橙皮苷(Hesperidin，HDN)对高脂饲喂诱导的小鼠肝氧化应激损伤的保护作用及作用机制。将18只雄性C57BL/6(20～23 g)小鼠，随机分为对照(control)组、高脂饮食(HFD)组、高脂饮食+橙皮苷(HFD+HDN)组(300 mg·kg-1)每组6只。control组小鼠饲喂常规饲料(脂肪含量10%、碳水化合物含量70%、蛋白质含量20%)；HFD组小鼠饲喂高脂饲料(脂肪含量60%、碳水化合物含量20%、蛋白质含量20%)；HFD+HDN组在饲喂高脂饲料的同时每天灌胃给药HDN 300 mg·kg-1。16周后腹腔注射3%戊巴比妥钠(60 mg·kg-1)对小鼠进行麻醉后进行眼球采血，采血完毕后对小鼠进行脱颈处死并解剖取肝脏组织，；使用试剂盒检测血液中肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性；使用试剂盒检测肝组织中氧化应激指标丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及总抗氧化能力(T-AOC)的水平；采集肝组织进行转录组学测序，筛选出HFD组和HFD+HDN组的差异基因集进行KEGG通路富集分析，以P<0.05作为显著性富集的阈值，据此筛选出HDN干预后影响最显著的一条信号通路；从筛选出的信号通路上挑选显著变化的基因通过qRT-PCR和蛋白免疫印迹方法，验证转录组学结果；检测mtDNA相对含量和线粒体外膜蛋白(TOMM20)相对表达量；检测肝组织ATP含量。结果显示：与HFD组相比，HDN干预改善了高脂饲喂引起的肝损伤，显著降低了小鼠血液中ALT以及AST活性(P<0.01)；显著降低小鼠肝MDA含量(P<0.01)；显著升高T-AOC、T-SOD以及GSH-Px水平(P<0.05)，KEGG富集分析，筛选出氧化磷酸化(OXPHOS)途径是最显著上调的信号通路(P<0.000 1)；与HFD组相比，HDN干预后肝组织Cox8b、Cox6a2、Gm10231、mt-Atp8、mt-Nd4l、Gm11237、Ndufb8、Ndufb10的mRNA相对表达量显著上调(P<0.05)，Atp6v0d2、Cox6c2的mRNA的相对表达量显著下调(P<0.05)。Cox6a2、Ndufb8、Ndufb10的蛋白表达量显著升高(P<0.05)，Atp6v0d2d蛋白表达量表达量显著降低(P<0.001)，与转录组学结果一致；与HFD组相比，HDN干预后TOMM20相对表达量、mtDNA相对含量、ATP含量显著升高(P<0.05)。结果提示，HDN通过调节OXPHOS途径降低高脂饲喂诱导的小鼠肝氧化应激。
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