miR-370调控MGMT增强替莫唑胺对胶质瘤细胞化疗敏感性的实验研究

作者：田风富; 张雪峰; 张文杰; 时敬国

来源：临床肿瘤学杂志, 2021, 26(06): 518-522.

• 脑胶质瘤
• mi R-370
• 替莫唑胺
• 敏感性
• 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶" name="keyword">O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶

目的探讨micro RNA-370(mi R-370)通过调控O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)增强替莫唑胺(TMZ)对胶质瘤化疗敏感性的机制研究。方法采用TMZ浓度梯度递增法体外建立U87/TMZR耐药细胞株,分别转染阴性空质粒和mi R-370 mimics作为mi R-NC组和mi R-370 mimics组,另将未经处理的U87/TMZR细胞作为对照组。采用实时荧光定量PCR(q PCR)和Western blotting检测mi R-370和MGMT表达。Target Scan在线预测和双荧光素酶报告实验分析mi R-370靶基因。采用MTT法和克隆形成实验检测各组细胞对替莫唑胺的敏感性。结果体外成功建立U87/TMZR耐药细胞株,U87/TMZR细胞mi R-370表达量较U87细胞降低(0.52±0.08 vs. 1.00±0.05,P<0.05); mi R-370 mimics组mi R-370表达量为5.65±0.77,高于对照组和mi R-NC组(P<0.05);而mi R-370 mimics组细胞MGMT蛋白表达量低于对照组(0.28±0.03 vs. 0.63±0.05,P<0.05)。经Target Scan在线预测和双荧光素酶报告实验结果显示,MGMT是mi R-370的靶基因。经不同浓度TMZ作用后,mi R-370 mimics组U87/TMZR细胞IC50为(72.73±5.19)μmol/L,克隆形成数为179±35,均低于对照组和mi R-NC组(P<0.05)。结论 TMZ耐药肿瘤细胞中MGMT表达量增加,同时mi R-370表达量降低。上调mi R-370表达可通过抑制MGMT转录提高U87/TMZR耐药细胞对TMZ的敏感性。

• 单位
  滨州医学院