大鼠CRIP2蛋白的表达和分离纯化

作者：高雪; 王枫; 邱建华

来源：生物技术通讯, 2012, (02): 201-203.

• CRIP2蛋白
• 大鼠
• 表达
• 纯化 cysteine-rich intestinal protein 2
• rat
• expression
• purification

目的:获得大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌中表达、纯化大鼠CRIP2(cysteine-rich intestinal protein 2)蛋白。方法:从大鼠主动脉组织中提取总DNA,RT-PCR扩增出相应大小的crip2 DNA片段,与pGEM-T-easy载体连接后测序;将测序正确的crip2按照BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pRSET A,将连接产物转化大肠杆菌BL21,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白,通过镍柱进行纯化。结果:PCR获得的crip2序列与GenBank报道的一致(为707 bp);重组融合蛋白在大肠杆菌BL21中以可溶形式高效...

• 单位
  第四军医大学; 中国人民解放军空军总医院; 西京医院