利用改进的手工克隆技术生产转GFP基因猪克隆胚胎

作者：张鹏; 杨珍珍; 窦红伟; 李伟杭; 律波; BolundLars; 杜玉涛; 谭萍萍; 马润林

来源：遗传, 2011, (05): 527-532.

• 手工克隆
• 体细胞核移植
• 绿色荧光蛋白
• 克隆胚胎 handmade cloning
• SCNT
• EGFP
• porcine blastocyst

通过体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)培育转基因动物新个体是当前被广泛使用的技术之一,但其生产成本高和转基因囊胚形成率低在很大程度上制约了该技术的应用。文章报告对该技术的一些改进以提高其成功率并降低成本。首先将增强型绿色荧光基因(EGFP)导入猪胎儿成纤维细胞中,通过荧光观察EGFP的表达来筛选适合做细胞核移植的体细胞。这样避免了外源EGFP基因虽已整合至猪基因组但不表达的情况,保证供体细胞100%是表达目标蛋白(绿色荧光蛋白)的细胞;然后利用新一代体细胞核移植技术——手工克隆技术(Handmade cloning,HMC)将供体细胞与卵母细胞...

• 单位
  深圳华大方舟生物技术有限公司; 深圳华大生命科学研究院; 中国科学院遗传与发育生物学研究所